基因治疗小鼠制图

　　□记者 俞陶然

　　晚报讯 上周末，国际著名学术期刊《细胞干细胞》在线发表了中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所李劲松研究组的成果，他们利用CRISPR-Cas9技术治愈了小鼠的白内障遗传疾病。《科学家》杂志对这项成果做了报道。CRISPR-Cas9技术介导的遗传疾病治疗研究，为人类基因治疗提供了一条新的思路。

　　遗传疾病指遗传物质的改变所导致的疾病，能通过生育遗传给后代，是困扰人类健康的一类重要疾病。彻底根治遗传疾病的方法，是通过基因治疗的手段修复改变的遗传物质，并将修复的遗传物质遗传给下一代，从而产生健康的后代。然而，科学家目前掌握的基因修饰手段还不能有效地对致病的基因序列进行修复，所以无法根治遗传疾病。

　　据李劲松研究员介绍，CRISPR-Cas9技术利用一段与靶序列相同的单导向RNA，引导Cas9核酸酶对特异靶向DNA进行识别和切割，造成DNA的双链或单链断裂；随后，细胞会利用自身具备的两种DNA修复机制对断裂的DNA进行修复。这一技术简单高效，自问世以来已被广泛地应用于各种模式生物。

　　为了验证该技术是否能用于高效治疗遗传疾病，研究人员选择小鼠白内障遗传疾病模型进行研究。该模型小鼠携带显性突变的Crygc基因，产生变性的晶状体蛋白而发生混浊，携带一个突变位点的新生小鼠即表现出症状。研究人员设计了针对突变Crygc基因的sgRNA，在直接将sgR－NA和Cas9注入杂合子的受精卵中后，发现有1/3新生小鼠的白内障症状被治愈。治愈的小鼠可以通过生殖细胞将修复的Crygc基因传递到下一代，表明白内障遗传疾病得到了根治。

　　李劲松告诉记者，基因治疗存在的一个潜在风险是脱靶效应，即Cas9被带到非Crygc基因的位点进行了异常切割，破坏了原本正常的基因。在这项研究中，他们预测存在10个潜在的脱靶位点，然而在对这些位点进行DNA测序后，发现12只治愈的小鼠中只有两只在一个位点上存在脱靶现象。李劲松表示，今后研究还需要进一步提高治愈的效率，避免脱靶现象出现。

(原标题：科学家治愈小鼠白内障遗传疾病)